عنوان المقالة: تحضير وسط زرعي جديد لتحفيز زيادة انتاج انزيم تحلل الخثرة Staphylokinase المنتج من بكتريا Staphylococcus aureus بأستخدام Acridine Orange(AO). Preparation of a new culture medium to stimulate increased production of Staphylokinase produced from Staphylococcus aureus by using Acridine Orange(AO). Preparation of a new culture medium to stimulate increased production of Staphylokinase produced from Staphylococcus aureus by using Acridine Orange(AO).
تحضير وسط زرعي جديد لتحفيز زيادة انتاج انزيم تحلل الخثرة Staphylokinase المنتج من بكتريا Staphylococcus aureus بأستخدام Acridine Orange(AO).
تصميم الدراسة Study design للعينات من نوع Cross-sectional study design من 500 عينة تعود لبكتريا S.aureus جمعت من مصادر سريرية مختلفة في مستشفيات بغداد شملت 280(56%) من اللوزتين Tonsillitis, 100(20%) من الأنف, 40(8%) من الأورام, 17(3.4%) من الادرار, 27(5.4%) من الدم , 36(7.2%) من الجلد (حب الشباب (Acne.
نتائج التشخيص بأستخدام Vitek2 وتشخيص العزلات المعزولة من الاورام بواسطة PCR للكشف عن جين 16SrRNA أثبتت ان جميع العزلات تعود الى بكتريا S.aureus .
نتائج النمو على الوسط الزرعي الجديد المضاف له المادة Acridine Orange(AO) اثبت وجود نمو بتركيز 10غرام الى الوسط الزرعي وكان لون البكتريا على الوسط الزرعي الجديد لون مختلف عن نموها في باقي الاوساط الزرعية المعروفة والخاصة لنمو بكتريا S.aureus ذات لون داكن وغامق جدا, اخضر داكن جدا وكذلك فقدت انتاجها لانزيم تحلل الدم Hemolysin بعدما كانت تنتج انزيم Hemolysin المسبب في تحلل الدم قبل نموها على الوسط الزرعي الجديد واصبحت غير منتجة للانزيم بعد نموها على الوسط الزرعي الجديد , اما فحص المضادات عمل لها بعد نموها على الوسط الزرعي الجديد وجد انها اصبحت حساسة لمضاد Vancomycin ومضاد Methicillin ومضاد Imipenem ومضاد Erythromycin ومضاد Oxacillin بعدما كانت مقاومة لهذه المضادات قبل زرعها على الوسط الزرعي الجديد , وهذا يدل على انها تحولت من بكتريا ضارية Virulent S.aureus الى بكتريا غير ضارية Non-Virulent S.aureus بسبب فقدها لمقاومة المضادات الحيوية وفقدها لانتاج انزيم تحلل الدم, اما فحصها لانتاج الانزيم تحلل الخثرة Staphylokinase على وسط اكار البلازما ووسط اكار الحليب فانها كانت منتجة للانزيم وبشكل عالي جدا Overproduction Staphylokinase مقارنة قبل زرعها على الوسط الزرعي الجديد المضاف له مادة AO وهذا مهم جدا في العلاج الطبي بسبب انتاج انزيم من بكتريا غير ضارية بدلا من أنتاج وأستخدام انزيم من بكتريا ضارية .
اما عند اضافة التراكيز 20, 30 غرام فلا يوجد اي نمو للبكتريا عند اضافة هذه التراكيز, النمو كان فقط في تركيز 10غرام.
كذلك تم فحص البكتريا النامية على الوسط الزرعي الجديد لأمتلاكها الجين Sak المشفر للانزيم المحلل للخثرة Staphylokinase والنتائج توضح امتلاكها الجين ولم تفقد الجين عند أجراء فحص جيني بأستخدام PCR .
الملخص الانجليزي
Abstact
Preparation of a new culture medium to stimulate increased production of Staphylokinase produced from Staphylococcus aureus by Acridine Orange(AO).
The study design of cases are Cross-sectional study that descriptive study by internal comparsion of 500 isolates collected from different provenance of human infections including 280(56%) from tonsils , 100(20%) nose, 40(8%) tumors, 17(3.4%) urine, 27(5.4%) skin and 36(7.2%) blood, the isolation and identification achieved by using Vitek2-GP and Genotypic detection PCR to confirmitive identification of S.aureus isolated from tumors.
The results of growth on the new cultural medium when added Acridine Orange(AO) showed there are growth when added 10 g to new culture medium, the growth of bacteria on new culture medium changed the color of bacteria different from the original of S.aureus become very dark and dark green color, also lost its blood hemolysis compared with the original became non hemolysis after growing on the new culture medium, either antibiotics susceptiblity test work after growing on the new culture medium that it became sensitive to Vancomycin, Methicillin, Imipenem, Erythromycin and Oxacillin compared with the original was resistant. The growth on new culture medium it lost resistance to antibiotics and lost the production of the hemolytic enzyme(hemolysis).
The test for the production of the Staphylokinase (Thrombolytic enzyme) on the plasma agar and milk agar medium, it was turn off overproduction to Staphylokinase when grown on new culture medium that Acridine Orange(AO) therefore turn off from harmful bacteria into non-harmful bacteris with overproduction of staphylokinase when added the concentrations 10 gm but no growth when added 20g, 30 g. The bacterium also examined on the new culture medium for having the Sak gene that encoding for Staphylokinase (Fibrinolytic enzyme), the results grant positive result for possess sak gene that encoded for Staphylokinase.
نبراس رضا محمد | Nebras Rada Mohammed | 18928