عنوان المقالة:تنقية وتقييد إنزيم الكيتيناز من Bacillus sp.R2 Affinity Purification and Immobilization of Chitinase from Bacillus sp.R2
بن عمر شبة | benamar cheba | 15815
- نوع النشر
- مقال علمي
- المؤلفون بالعربي
- بن عمر شبة -طه ابراهيم زغلول - احمد رفيق المهدي و محمدهشام المصري
- المؤلفون بالإنجليزي
- Ben Amar Cheba -Taha Ibrahim Zaghloul - Ahmad Rafik EL-Mahdy - Mohammad Hisham EL-Massry
- الملخص العربي
- Bacillus sp. تمت تنقية R2 chitinase إلى التجانس باستخدام ترسيب كبريتات الأمونيوم بنسبة تشبع 80٪ ، وكروماتوجرافيا تقارب على عمود الكيتين قشرة السلطعون المتضخم ، وتلاه كروماتوجرافيا الترشيح الهلامي في Sephadex G-100 ؛ تمت تنقية الإنزيم إلى 14.89 ضعف وعائد 14.77٪ على التوالي. علاوة على ذلك ، خضع إنزيم الكيتيناز المنقى لثلاث تقنيات تثبيت على عشر ناقلات صلبة مختلفة ؛ 1- تثبيت الامتزاز الفيزيائي على الفحم المنشط وناقلات هلام السيليكا. 2-الارتباط التساهمي على الكيتين والكيتوزان قشرة السلطعون ؛ 3-أيوني ملزم على CM-Sepharose و Q-Sepharose و DEAE Cellulose و Amberlite IRC 50 و Amberlite CG-120 (NA) و Amberlite CG -4B (OH) على التوالي. أظهرت نتائج التثبيت أن الربط التساهمي والأيوني كان أفضل التقنيات بينما أعطى الشيتوزان والأمبرلايت IRC50 والكيتين أعلى إنتاجية للتثبيت 72.9 و 70.26 و 63.53٪ مع أعلى إنتاجية نشاط 63.36 و 58.26 و 53.03٪ على التوالي. تعمل هذه النتائج على تحسين فعالية الكيتين قوقعة السلطعون المتضخمة كمصفوفة لتنقية تقارب الكيتيناز بينما الكيتين والشيتوزان كالبوليمرات الحيوية الطبيعية النشطة لإنتاج الكيتيناز المستمر من خلال التثبيت.
- الملخص الانجليزي
- Bacillus sp. R2 chitinase was purified to homogeneity using ammonium sulphate precipitation at 80% saturation, affinity chromatography on swollen crab shell chitin column, and followed by gel filtration chromatography on Sephadex G-100; the enzyme was purified to 14.89-fold and yield of 14.77%, respectively. Furthermore the purified chitinase was subjected to three immobilization techniques on ten various solid carriers;1-physical adsorption immobilization on activated charcoal and silica gel carriers; 2-covalent binding on crab shell chitin and chitosan; 3-Ionic binding on CM-Sepharose, Q-Sepharose, DEAE Cellulose, Amberlite IRC 50, Amberlite CG-120 (NA) and Amberlite CG -4B (OH)respectively. Immobilization results revealed that covalent and ionic binding were the best techniques whereas chitosan, Amberlite IRC50 and chitin gave the highest immobilization yields 72.9, 70.26 and 63.53% with the highest activity yields 63.36, 58.26 and 53.03% respectively. These findings improve the effectiveness of swollen crab shell chitin as matrix for chitinase affinity purification whereas chitin and chitosan as active natural biopolymers for chitinase continuous production through immobilization.
- تاريخ النشر
- 03/04/2015
- الناشر
- Procedia Technology: https://www.sciencedirect.com
- رقم المجلد
- 19
- رقم العدد
- ISSN/ISBN
- 2212-0173 ISSN
- رابط DOI
- https://doi.org/10.1016/j.protcy.2015.02.137
- الصفحات
- 958-964
- رابط الملف
- تحميل (0 مرات التحميل)
- رابط خارجي
- https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2212017315001383
- الكلمات المفتاحية
- Bacillus sp .R2chitinchitinaseaffinity purificationimmobilizationactivity yield