عنوان المقالة: دراسة بعض الطرز الوراثية لجين مستقبل فيتأمين D والتغيرات الخلوية على نساء عراقيات عقيمات مريضات بمتلازمة تعدد الاكياس المبيضية Study of some genetic variants of vitamin D receptor gene and cytogenetic changes on Iraqi infertile women with polycystic ovary syndrome
الخلاصة
متلازمة تعدد الاكياس المبيضية (PCOS) هي اضطراب الغدد الصماء الأكثر شيوعا، التي تحدث في النساء الشابات في سن الإنجاب، التغايرات في الجين المستقبل لفيتامين D ذات صلة بأمراض التمثيل الغذائي المشترك في المجتمعات ، وقد أجريت هذه الدراسة للتحقق في ما إذا كانت هذه التغايرات مرتبطة بقابلية الاصابة بمتلازمة تعدد الاكياس المبيضية ومعرفة مدى تأثير هذه التغايرات على مستوى LH,FSH,TSH وهرمون Prolactin وزيادة في عدد الـ Micronucleus (MN) فضلا عن تعزيز الـ Sister chromatid exchange(SCE) .
أجريت هذه الدراسة في معهد الهندسة الوراثية والتقانات الاحيائية للدراسات العليا - جامعة بغداد خلال الفترة من 1 نوفمبر 2016 حتى نهاية أغسطس 2017، تم أخذ عينات من مريضات تعدد الاكياس المبيضية من مستشفى كمال السامرائي لعلاج العقم في بغداد .
النساء اللواتي يعانين من متلازمة تعددالاكياس المبيضية (ن = 50) و مجموعة السيطرة السليمة (ن = 50)، تم تسجيلهن، تم تحديد طفرات نقطية genotyping for VDR gene SNPs(rs2228570، rs7975232 و rs731236) باستخدام تقنية Taqman genotyping assay . وأظهرت النتائج أن توزيع التراكيب الوراثية وترددات الاليلات في الطفرة rs2228570 من جينVDR والانماط الجينية TT, TC TC+CC, لم يلاحظ وجود فروق ذات دلالة إحصائية في نسبة التردد بين النساء الصحيحات ظاهرياً والمرضى الذين يعانون من متلازمة تعدد الاكياس المبيضية. في حين، كان تواتر النمط الجيني CC أقل (p <0.05) أقل في المرضى الذين يعانون من متلازمة تعدد الاكياس المبيضة مما في النساء الصحيحات ظاهريا. في حين أن توزيع التراكيب الوراثية وتردد الاليلات في الطفرة rs7975232C>A ، وكان تواتر النمط الوراثي CC (p <0.05) أقل في المريضات الذين يعانون من متلازمة تعددالاكياس المبيضية من المريضات الصحيحات ظاهرياً.على النقيض من ذلك، كان تواتر النمط الوراثي CA مختلف بشكل كبير ( p <0.05) في المرضى الذين يعانون من متلازمة تعددالاكياس المبيضية عند مقارنتهم بنساء صحيحات ظاهرياً. كان تراكيز النمط الجيني في الطفرة rs731236 T>C أقل بكثير (p <0.05) في المرضى الذين يعانون من متلازمة تعددالاكياس المبيضية مقارنة مع النساء الاصحاء ظاهرياً. في حين أن ذات الصلة مع الانماط الجينية TC، CC و TC + CC ، لم يلاحظ وجود فروق ذات دلالة إحصائية في نسبة التردد بين الاصحاء ظاهرياً ومرضى تعددالاكياس المبيضية. وعلاوة على ذلك الـ VDR SNPsالثلاثة ، تم دراسة ثمانية haplotypes ممكنة، مع TTA و TTC كونها الأكثر شيوعا في كلا المجموعتين (المرضى والاصحاء). على وجه الخصوص، أظهرت TCC hapoltype وجود دلالة إحصائية (p <0.05) بين المرضى الذين يعانون من متلازمة تعددالاكياس المبيضية والنساء الصحيحات ظاهرياً. وأظهرت النتائج أن الـ TTC / CCA haplotype combination كان معنويا (p <0.05) أعلى في مرضى متلازمة تعددالاكياس المبيضية مقارنة مع الأشخاص الأصحاء ظاهرياً. وجدت هذه الدراسة عدم ارتباط بين كل من heterozygous and homozygous mutants rs2228570 , rs 731236 في الجين المستقبل لفيتامين D مع حدوث متلازمة تعددالاكياس المبيضية ، في حين وجدت ان 7975232 rs في الجين المستقبل لفيتامين D أظهرت خطرا على قابلية تطور متلازمة تكيس المبايض.
تم إجراء التحليل الهرموني LH, FSH, TSH وهرمون الـ prolactin باستخدام Automated Immune Assay (AIA). وتشير النتائج إلى أن تراكيز الـ LH, FSH, TSH لم تتأثر بالتغايرات الوراثية المدروسة SNPs of VDR gene. في كل من rs2228570، rs7975232 و rs731236 ، في حين كانت مستويات الـ Prolactin في مصل الدم بشكل ملحوظ (p <0.05) أعلى في مريضات متلازمة تعددالاكياس المبيضية مقابل النساء الصحيحات ظاهرياً.
تم تقييم عدم الاستقرار الجينومي من خلال قياس تواتر تبادل الكروماتيد ( (SCEوالنواة الصغيرة ( (MNفي 32 مريضة بمتلازمة تعددالاكياس المبيضية كانت نتيجة فحص الـ لها homozygouse mutant , و 34 مريضة كانت نتيجة فحص الـ genotyping assay لها heterozygouse و 14 امرأة صحيحة ظاهرياً من 50 امرأة كمجموعة سيطرة، اظهرت النتائج اختلافات معنوية في مستوى النوى و تبادل كروماتيد الشقيقة في المرضى الذين يعانون من متلازمة تعددالاكياس المبيضية لكل تغاير وراثي من الانماط الوراثية لجين مستقبل فيتامين D مقارنة مع النساء الصحيحات ظاهرياً .
الملخص الانجليزي
Polycystic ovary syndrome (PCOS) is the most frequent endocrinological disorder , occurring in young women of reproductive age , Variants on vitamin D receptor (VDR) gene have been related to metabolic co morbidities in general population , this study was carried out to investigate whether the VDR gene polymorphisms are associated with susceptibility to PCOS, investigation the effect of these polymorphisms on the level of LH, FSH, TSH and Prolactin hormones and the increased of micronucleus frequencies as well as the enhancement of sister chromatid exchanges .
This study was carried out in the Institute of Genetic Engineering and Biotechnology for Postgraduate Studies - University of Baghdad through the period from 1 November 2016 until the end of August 2017, The PCOS patients were taken from the Kamal Al-Samarraee infertility treatment Hospital in Baghdad.Women with PCOS.
Women with PCOS (n=50) and apparently healthy control group (n=50) , were enrolled , genotyping of VDR gene SNPs (rs2228570 , rs7975232 and rs731236) were determined by using Taqman genotyping assay . The results showed that the distribution of genotypes and alleles frequencies at rs2228570 SNP of VDR gene as related with no significant differences in frequency percentage were noted between apparently healthy subjects and patients with polycystic ovary syndrome. Whereas, the frequency of CC genotype was significantly (p<0.05) lower in patients with polycystic ovary syndrome than in apparently healthy subjects . While the distribution of genotypes and alleles frequencies at rs7975232 C>A polymorphism ,the frequency of wild CC genotype was significantly (p<0.05) lower in PCOS patients than in apparently healthy subjects .In contrast, the frequency of heterozygous CA genotype was significantly (p<0.05) higher in PCOS patients when compared with apparently healthy subjects.The frequency of TT genotype at rs731236 T>C polymorphism was significantly (p<0.05) lower in PCOS patients than in apparently healthy subjects . While as related with TC, CC and combined TC+CC genotypes, no significant differences in frequency percentage were observed between apparently healthy subjects and PCOS patients. Further the three VDR SNPs, were presented eight possible haplotypes, with TTA and TTC being the most common in both groups (patients and controls). In particular, the TCC haplotype showed statistically significant (p<0.05) distribution between PCOS patients and apparently healthy controls . and the results showed that the frequency of TTC / CCA haplotype combination was significantly (p<0.05) higher in PCOS patients than in apparently healthy subjects . This study found that no association between both heterozygous and homozygous mutants at rs2228570 and rs 731236 of VDR gene with the incidence of PCOS , while heterozygous at rs 7975232 of VDR gene showed a risk for susceptibility of the development of PCOS .
Hormonal analysis for LH, FSH, TSH and Prolactin was performed by using Automated Immune Assay (AIA).The results indicate that serum LH , FSH and TSH concentrations were unaffected by the studied SNPs of VDR gene. Within carriers of genotypes of rs2228570 , rs7975232 and rs731236 SNPs in VDR gene, while serum prolactin levels were significantly (p<0.05) higher in PCOS patients versus controls.
The genomic instability were evaluated by measured the frequency of micronucleus and sister chromatid exchange in 32 PCOS patients who have homozygouse mutant result in genotyping assay , and from 34 PCOS patients who have heterozygouse result assay. as well as 14 apparently healthy women from 50 women as control group, PCOS are classified depending on the results of the genotyping assay ,patients with PCOS for each of VDR gene polymorphisms compared with normal women.
د. سناء جاسم كاظم | Dr.Sanaa Jassim Kadhim | 2022