عنوان المقالة:عزل , وتشخيص , والتبادل الوراثي بين بكتريا ضمات الكوليرا والزائفة الزنجارية Isolation , Identification and Genetic Exchange between Vibrio cholera and Pseudomonas aeruginosa
تم جمع 180 عينة من مياه الصرف الصحي من منطقة بغداد التي تم تجريمها. من عينات الصرف الصحي التي تم الحصول عليها ، تم تحديد 70 عزلة (38.9٪) من الكوليرا V غير 01 ، و 4 عزلات (2.2٪) من V. sholerae 01 تم عزل 30 عزلة من P. acruginosa (19.1٪) من 157 عينات سريرية مختلفة. تم التحقيق في نمط الحساسية للمضادات الحيوية لجميع العزلات من V الكوليرا 01 و P aeruginosa. أوضحت النتائج أن جميع عزلات V sholeras 01 كانت مقاومة للكاربنيسيلين ، الستربتوميسين ، التوبروميسين ، النتروفوراناتوين ، بوليميكسين ب ، الكلورامفينيكول ، لينكوميسين وتريميثوبريم-سلفاميثوكسازول (Co-trimarazole) ، في حين كانت جميعها عرضة للبسيسيلين ، حمض الناليديكسيك ، الاريثروميسين ، الريفامبيسين ، الكليندامايسين. ظهرت ثلاث عزلات مقاومة للتتراسيكلين ، بينما كانت العزلة واحدة مقاومة للأمبيسلين ، سيفوتاكسيم ، سيفالوثين ، وجنتامايسين. من ناحية أخرى ، كانت جميع عزلات P aeruginosa مقاومة للبنسلين G ، الأمبيسيلين ، ampiclox ، cephalexin ، cefotaxim ، cephalothin ، erythromycin ، tetracycline ، nitrofuranatoin ، DIxipijeu chloramphenicol ، lincomycin و clindamycin. 29 عزلة (96.7٪) أظهرت مقاومة للعديد من الستربتوميسين وتريميثوبريم - سلفاميثاكسازول ، 28 عزلة (93.3٪) للكاربنيسيلين والريفامبيسين. 27 عزلة مقاومة للجنتاميسين و 11 عزلة (36.7٪) مقاومة للبروميسين. كانت جميع العزلات حساسة للبوليميكسين - ب. اعتمادا على نتائج اختبار حساسية القرص لـ V. cholerae 01 MZW 41 و P aeruginosa W 109 ، تم اختيار ستة مضادات حيوية لاستخدامها كعلامات وراثية في تجربة الاقتران بين هاتين العزلتين ، وهذه هي البنسلين G (PG) والأمبيسيلين (AMP) والجنتاميسين (GM) والستربتوميسين (S) والإريثروميسين (E) والتريميثوبريم الثالث سلفاميثاكسازول (TMP-SMZ). كانت التركيزات المثبطة الدنيا الممنوحة لهذه المضادات الحيوية على النحو التالي: 16 ميكروغرام / مل ، 64 ميكروغرام / مل ، 32 ميكروغرام / مل ، 64 ميكروغرام / مل ، 32 ميكروغرام / مل ، 16-251 ميكروغرام / مل على التوالي. أظهرت نتائج استخلاص DNA البلازميد (من V sholerae 01 MZW41) وجود حزامين بلازميد. إحداها كانت ذات وزن جزيئي مرتفع (pWL) ، والثانية كانت صغيرة (pWS). أظهر ملف P aeruginosa W109 البلازميد وجود ثلاثة أشرطة بلازميد ذات وزن جزيئي مختلف (كلها صغيرة) (pS1 ، pS2 ، (تم إجراء العديد من تجارب الاقتران بين V. cholerae 01 MZW 41 و P aeruginosa W109. وأظهرت النتائج نجاح هذا الاقتران بين هاتين العزلتين (P. aeruginosa اكتسبت علامات المقاومة لـ S و SXT) بمعدل تردد 3.51 × 10 ° عن طريق الحصول على العديد من المواد المحولة. استخراج DNA البلازميدي لبعض هذه المواد المتقاربة مقارنة مع محتوى البلازميد للعزلين ( ظهر المتبرع والمتلقي) وجود البلازميد الكبير (pWL) الذي ينتقل من V. cholerae 01 MZW41 إلى P aeruginosa W109 ، يشير إلى أنه كان قابلاً للانتقال الذاتي ويحمل علامات مقاومة للستربتوميسين وتريميثوبريم سلفاميثاكسازول. وأظهرت النتائج أن كانت سمات المقاومة للستربتوميسين وتريميثوبريم سلفاميثاكسازول مستقرة لمدة 68 ساعة (حوالي 204 أجيال)
الملخص الانجليزي
Abstract 180 sewage samples were collected from incriminated area of Baghdad. Out of the sewage samples that were obtained, 70 isolates (38.9%) of V cholerae non-01, and 4 isolates (2.2%) of V. sholerae 01 were identified 30 isolates of P. acruginosa (19.1%) were collected from 157 different clinical samples. Investigation of antibiotic susceptibility pattern was done for all Isolates of V cholerae 01 and P aeruginosa. Results have indicated that all V sholeras 01 isolates were resistant to carbenicillin, streptomycin, tobromycin, nitrofuranatoin, polymyxin B, chloramphenicol, lincomycin and trimethoprim-sulfamethoxazole (Co-trimarazole), while all of them were susceptible to penicillin G, ampiclox, cephalexin, nalidixic acid, erythromycin, rifampicin and clindamycin. Three isolates appeared resistance to tetracycline, while only one isolate was resistant to ampicillin, cefotaxim, cephalothin, and gentamycin. On the other hand, all P aeruginosa isolates were resistant to penicillin G, ampicillin, ampiclox, cephalexin, cefotaxim, cephalothin, erythromycin, tetracycline, nitrofuranatoin, DIxipijeu chloramphenicol, lincomycin and clindamycin. 29 isolates (96.7%) showed resistant to streptomycin, and trimethoprim - sulfamethaxazole, 28 isolates (93.3%) to carbenicillin and rifampicin. 27 isolates (90%) were resistant to gentamycin, and 11 isolates (36.7%) were resistant to tobromycin. All isolates were susceptible to polymyxin - B. Depending on the results of disk sensitivity test for V. cholerae 01 MZW 41 and P aeruginosa W 109, six antibiotics were chosen for using them as genetic markers in conjugation experiment between these two isolates, these are penicillin G (PG), ampicillin (AMP), gentamycin (GM), streptomycin (S), erythromycin (E), and trimethoprim III
sulfamethaxazole (TMP-SMZ). The Minimum Inhibitory Concentrations conferred for these antibiotics were as follows: 16ug/ml, 64ug/ml, 32ug/ml, 64ug/ml, 32µg/ml, and 16-251ug/ml respectively. Plasmid DNA extraction (fromV sholerae 01 MZW41) results, showed the presence of two plasmid bands. One of them was with a high molecular weight (pWL), while the second was small'(pWS). P aeruginosa W109 plasmid profile showed the presence of three plasmid bands with different molecular weight (all were small) (pS1, pS2, (Esd Many conjugation experiments were done between V. cholerae 01 MZW 41 and P aeruginosa W109. Results showed the success of this conjugation between these two isolates (P. aeruginosa acquired the resistance markers of S and SXT) at a frequency rate 3.51 x 10° by getting many transconjugantes. Plasmid DNA extraction for some of these transconjugants comparing with the plasmid content for the two isolates (Donor and recipient), appeared the presence of the large plasmid (pWL) which transfer from V. cholerae 01 MZW41 to P aeruginosa W109, indicate that it was self-transmissible and carried a resistance markers for streptomycin and trimethoprim-sulfamethaxazole. Results showed that the resistance traits of streptomycin and trimethoprim sulfamethaxazole were stable for 68h (about 204 generations).
أ.م.د. وئام أحمد العاملي | Assist. Prof. Dr. Wiaam Ahmed Al-Amili | 3076