عنوان المقالة:العديد من تقنيات الصبغات لزيادة وضوح حويصلات الأكنثاميبا Several staining techniques to enhance the visibility of Acanthamoeba cysts
ا.د. نجوى مصطفى السيد | Nagwa Mostafa El-Sayed | 3516
نوع النشر
مقال علمي
المؤلفون بالعربي
نجوى مصطفي السيد , وفاء محمد هيكل
المؤلفون بالإنجليزي
Nagwa Mostafa El-Sayed &Wafaa Mohamed Hikal
الملخص العربي
الأكنثاميبا هي نوع من الأميبا الحرة واسعة الإنتشار في البيئة و تسبب إلتهاب القرنية في الإنسان . تأخر التشخيص أو التشخيص الخاطئ يؤدي إلى زيادة إلتهاب القرنية وفقدان البصر. لذلك فإن التشخيص الدقيق والسريع لإلتهاب القرنية الأكنثاميبي يؤدي لنجاح العلاج و يعطي نتائج جيدة. وتهدف هذه الدراسة إلى إستخدام تقنيات من الصبغات المختلفة لتسهيل التعرف على حويصلات الأكنثاميبا. وقد تم عزل حويصلات الأكنثاميبا بواسطة زراعة العينات المأخوذة من القرنية وعينات الماء على أطباق الأجار المزود بالمغذيات القولونية . وعمل مزرعة فرعية من المزرعة الإيجابية ثم عزل الحويصلات منفردة. وصبغت هذه الحويصلات بإستخدام الصبغات المؤقتة ; اليود، إيوسين، الميثيلين الأزرق، وكالكوفلور البيضاء وأيضا بالصبغات الدائمة ; صبغة التريكروم المعدلة ، جيمينيز والجيمسا. وقورنت هذه الصبغات على أساس جودة الصبغة بما في ذلك وضوح التفاصيل المورفولوجية، والتميز بين السيتوبلازم والنواة واللون والتباين وكذلك غيرها من الخصائص الأخرى مثل سهولة المناولة، والوقت الذي تستغرقه كل صبغة والتكاليف. و تبين أن الصبغات المؤقتة ذات كفاءة في توضيح التفاصيل المورفولوجية لحويصلات الأكنثاميبا. ومن جهة أخرى كانت صبغة التريكروم المعدلة للشرائح الأكثر ثباتا لرؤية حويصلات الأكنثاميبا تليها جيمينيز وجاء قي المرتبة الأخيرة الجيمسا التي أعطت أقل وضوحا لحويصلات الأكنثاميبا بسبب صبغها بلون موحد مع كثافة الخلفية. وقد أظهر ترتيب إستخدام الصبغات المرتبة الأعلى لصبغة اليود (92%) تليها صبغة الإيوسين (84%) ثم الجيمينيز (76%) والميثيلين الأزرق (72%) والكالكوفلور (64%) وصبغة التريكروم المعدلة56%) ) , وأقلهم صبغة الجيمسا (44 %). الخلاصة: إستخدام تقنيات من الصبغات المختلفة يساعد علي زيادة التعرف على حويصلات الأكنثاميبا.
الملخص الانجليزي
Acanthamoeba is one of the most common freeliving amoebae. It is widespread in the environment and can infect humans causing keratitis. Delayed diagnosis or misdiagnosis leads to extensive corneal inflammation and profound visual loss. Therefore, accurate and rapid diagnosis of Acanthamoeba keratitis is essential for successful treatment and good prognosis. This study was designed to use different staining techniques to facilitate the identification of Acanthamoeba cysts. Acanthamoeba cysts were isolated by cultivation of either corneal scraping specimens or tap water samples onto non-nutrient agar plates seededwith Escherichia coli. Subcultures were done from positive cultures until unique cysts were isolated. Acanthamoeba cysts were stained temporarily using iodine, eosin, methylene blue, and calcofluor white (CFW) stains and as permanent slides after processing for mounting using modified trichrome, Gimenez and Giemsa staining. These stains were compared on the basis of staining quality including clarity of morphological details, differentiation between cytoplasm and nuclei, color and contrast, and also other characteristics of the staining techniques, including ease of handling, time taken for the procedure, and cost effectiveness. The cysts of Acanthamoeba were recognized in the form of double‐walled cysts: the outer wall (ectocyst) that was being differentiated from the variably stained surrounding background and the inner wall (endocyst) that was sometimes stellated, polygonal, round, or oval and visualized as separate from the spherical, sometimes irregular, outline of the ectocyst. Regarding the temporary stains, it was found that they were efficient for visualizing the morphological details of Acanthamoeba cysts. In CFW staining, Acanthamoeba cysts appeared as bluish-white or turquoise oval halos although the internal detail was not evident. On the other hand, the results of permanent-stained slides showed the most consistent stain for identification of Acanthamoeba cysts was modified trichrome followed by Gimenez stain and lastly Giemsa stain that gave poor visibility of Acanthamoeba cysts due to the intense staining background and monochrome staining of parasite. In the present study, multi-attribute ranking of the used staining techniques showed the highest rank for iodine stain (92%) followed by eosin stain (84 %), Gimenez stain (76 %), methylene blue (72 %), CFW (64 %), modified trichrome (56 %), and the least was Giemsa stain (44 %). In conclusion, the staining techniques enhance the overall visibility of Acanthamoeba cysts.
تاريخ النشر
01/03/2015
الناشر
Parasitology Research
رقم المجلد
114
رقم العدد
3
ISSN/ISBN
ISSN 0932-0113
رابط DOI
https://doi.org/10.1007/s00436-014-4190-4
الصفحات
830–823
رابط الملف
تحميل (0 مرات التحميل)
رابط خارجي
https://link.springer.com/article/10.1007/s00436-014-4190-4
الكلمات المفتاحية
Acanthamoeba cyst . Stain . Gimenez . Trichrome . Calcofluor . Giemsa . Methylene blue
رجوع