عنوان المقالة:الكشف الجزيئي ومقاومة المضادات الميكروبية لبكتريا perfringens Clostridium المعزولة من مرضى السكري والجروح الناجمة عن الاطلاقات النارية Molecular detection and antimicrobial resistance of Clostridium perfringens isolated from diabetic patients and bullet wounds
علياء محمد حمود، ميساء صالح الشكري، علاء هاني الجراخ
English Authors
Aliaa Mohamed Hmood, Maysa S M Al-Shukri, Alaa H Al-Charr
Abstract
Clostridium perfringens هو سبب رئيسي للغنغرينا الغازية. ترتبط إمراضية بكتريا C. perfringens المنتجة للسموم. تم تصميم هذه الدراسة لغرض عزل ، وتشخيص وراثي ، ودراسة الحساسية للمضادات الحيوية لأنماط من C. بيرفرينجنز المعزولة من العينات السريرية. مسحات الجرح المختلفة (من مرضى السكري والتهاب النسيج الخلوي) ، وأخذت الجروح الناجمة عن الرصاصة من 140 مريضا. لعزل البكتيريا اللاهوائية ، تم تحضين العينات فوراً بطريقة لاهوائية ثم تم تحديدها وفقاً للخصائص الزرعية والاختبارات البيوكيميائية. تم إستخلاص الحمض النووي من جميع العينات. تم إجراء تفاعل سلسلة البوليميراز للكشف عن 16SrRNA والداخلية. transcribed spacer (ITS) genes of C. perfringens. تم تحديد قابلية العزلات البكتيرية على مقاومة المضادات الحيوية المختلفة باستخدام نظام Vitek 2 واختبار انتشار القرص.
Abstract
Clostridium perfringens is a major cause of gas gangrene. The morbidity of C. perfringens is connected with producing toxins. This cross-sectional study was designed to isolate, genetically diagnose, and study the antibiotic susceptibility patterns of C. perfringens isolated from clinical samples. Different wound swabs (from diabetic patients, cellulitis,
and bullet wounds) were taken from 140 patients. For isolation of anaerobic bacteria, samples (in thioglycolate broth) were immediately incubated anaerobically then identified according to the cultural properties and biochemical tests. DNA was extracted from all specimens. Polymerase chain reaction was applied for detection of 16SrRNA and internal transcribed spacer (ITS) genes of C. perfringens. The susceptibility of bacterial isolates to different antibiotics was
determined using Vitek 2 system and disk diffusion test. Out of 140 clinical samples collected during this study,
3 (2.14%) C. perfringens isolates were recovered of which 2 isolates (1.43%) obtained from diabetic patients and
one (0.71%) from bullet wounds. Results also showed that only 7 isolates (5%) were detected by a molecular method using specific primers 16S rRNA and ITS genes of C. perfringens. Results of antibiotic susceptibility testing showed that all isolates were highly susceptible to penicillins and β-lactamase inhibitors, metronidazole, and aminoglycosides. On the other hand, all isolates were highly resistant to tetracycline, levofloxacin, and erythromycin.
The susceptibility patterns of C. perfringens isolates showed that all isolates were multidrug resistance. Using the amplification of ITS gene increases specificity and sensitivity (by reducing non-specific annealing and primer dimer formation) which increases the probability of detection of suspected C. perfringens isolates.
أ.د. علاء هاني الجراخ | Prof. Alaa H. Al-Charrakh | 20014