عنوان المقالة:إستخدام تكنيك الـ RAPD لتحليل عزلات رالستونيا سولاناسيرم (Ralstonia solanacearum) المحليه ودراسة العلاقه بين نشاط إنزيم البولى جالاكتيورينيز (Polygalacturonase) والقدره على عدوى أصناف مختلفه من البطاطس RAPD Analysis of Some Local R. solanacearum Isolates and Study the Relationship Between Polygalacturonase Activity and Infection of Different Potato Cultivars
حنفى حمزه ، السيد السيد حافظ ، منال مصطفى عبدالرحمن ، ساميه أحمد مدكور ، هاديه هيكل ، إبراهيم أحمد عدس
English Authors
H.A. Hamza, E.E. Hafez, Manal M. Abd El-Rahman, Samia A. Madkour, Haida A. Heikal and I. A. Adss
Abstract
تم عزل سبعة عزلات (Rs1 ، Rs2 ، Rs3 ، Rs4 ، RS5 ، Rs6 و Rs7) من بكتيريا العفن البنى فى البطاطس (R. solancearum) من درنات بطاطس مصابه تم تجميعها من عدة محافظات بجمهورية مصر العربيه . تم إختبار القدره المرضيه لهذه العزلات على صنف البطاطس المنزرع سبونتا ، وهو معروف بحساسيته العاليه للإصابه بالمرض ، حيث أظهرت النتائج أن العزلات (Rs2 ، Rs5 و Rs3) إختلفت فى قدرتها المرضيه (عاليه ، متوسطه و ضعيفه) ، على التوالى . تفرز هذه البكتريا إنزيم البولى جالاكتيورينيز (polygalacturonase) الذى يعمل على هدم جدار الخليه النباتيه ، مما يساعدها على إحداث الإصابه . لذا أُستخدمت السبعة عزلات بكتيريه لتقدير نشاط هذا الإنزيم . العزلات (Rs2 ، Rs5 و Rs3) أظهرت نشاط إنزيمى عالى ، متوسط و منخفض ، على التوالى . تم إختبار هذه العزلات الثلاثه على أصناف البطاطس المنزرعه ؛ سبونتا ، كارا ، و نيكولا ، كان الصنف نيكولا أكثر مقاومه للإصابه ، بينما الصنف سبونتا كان أكثر حساسيه للإصابه و الصنف كارا متوسط الحساسيه للإصابه .
تم إستخدام تقنية الـ RAPD للتفرقه بين العزلات البكتيريه المختلفه ، حيث تم إستخدام ستة بادئات عشوائيه مع السبع عزلات بكتيريه . أظهرت النتائج إختلافات واضحه بين السبع عزلات بكتيريه من حيث عدد الحزم الكلى الناتجه ، كذلك كان هناك حزم متعددة الأشكال (polymorphic) ضمن جميع العزلات . شجرة القرابه الوراثيه قسمت العزلات المختبره إلى مجموعتين أساسيتين ؛ أحداهما (مجموعه أ) تضم العزلات (Rs1 ، Rs5 ، Rs6 و Rs7) ، والأخرى (مجموعه ب) تضم العزلات (Rs2 ، Rs3 و Rs4) .
Abstract
Seven bacterial isolates were isolated from infected potato tubers collected from different governorates of Egypt. Pathogenicity test of isolates on Spunta potato cultivar which was known to be highly susceptible to the infection by R. solanacearum showed that the isolates (Rs2, Rs5 and Rs3) differed in their virulence (high, moderate and weak), respectively. R. solanacearum produces several extracellular plant cell wall-degrading enzymes that are suspected to be virulence factors. The Seven isolates were used to determine the activity of Polygalacturonase (PG) enzyme. Rs2, Rs5 and Rs3 isolates showed high, moderate and low enzyme activity, respectively. These isolates were tested on potato cultivars Spunta, Kara and Nicola. Nicola cultivar was the most resistant, while Spunta was the most susceptible. Kara proved to be moderately susceptible. Using of six primers in RAPD-PCR showed clear differences among the seven isolates on the basis of amplified product band patterns. All primers showed polymorphic bands among all the isolates. The dendrogram generated showed that the examined isolates were classified into two main clusters, the isolates Rs1, Rs5, Rs6 and Rs7 in cluster A, while, the isolates Rs2, Rs3 and Rs4 in cluster B.
أ.د. هاديه أحمد هيكل | Prof. Dr. Hadia Ahmed Heikal | 8456