عنوان المقالة:إستحداث نباتات متقزمة من Encelia farinosa بإستخدام السيكوسيل وتقييم النباتات الناتجة بإستخدام الواسمات الجزيئيه RAPD و ISSR . Induction of dowrfism in Encelia farinosa by cycocel and evaluation of regenerants using RAPD and ISSR Markers.
أُستخدمت مادة السيكوسيل بتركيزات مختلفه (1000 ، 2000 ، 3000 و 4000 جزء فى المليون) لإستحداث نباتات متقزمة من نبات الزينة الـEncelia farinosa خلال الموسمين 2004/2005 و 2005/2006 . ثم تقييم النباتات الناتجه بإستخدام الواسمات الجزيئيه لتكنيكات الـ RAPD و الـ ISSR . وقد أظهرت النتائج أن تأثير السيكوسيل على النباتات كان مرتفعاً معنويا بالمقارنة بالكنترول. وكان أعلى تأثير للسيكوسيل على النبات عند تركيز 4000 جزء فى المليون حيث أظهر أقصى إنخفاض فى إرتفاع النبات والمساحة الورقية وكذلك فى الوزن الجاف والرطب للأوراق. من ناحية أخرى فإن عدد الفروع/ النبات ومحتوى الأوراق من الكلوروفيل قد إزداد بزيادة تركيز السيكوسيل وكان أعلى متوسط عند أعلى تركيز للسيكوسيل 4000 جزء فى المليون. كما تم الحصول على تغيرات مورفولوجية مثل التغيرات فى شكل الورقة وشكل النبات وأيضا الحصول على نباتات متقزمة وذلك عند التركيزات العالية من السيكوسيل. وللتقييم الجزيئى أُستخدمت ستة بادئات لتكنيك الـ RAPD و 13 بادىء لتكنيك الـ ISSR حيث تم الحصول على إجمالى 132 حزمه و 159حزمه للـ RAPD و الـ ISSR على التوالى . وقد أوضحت النتائج أن أقصى عدد من الحزم المميزه كانت 7 حزم و 20 حزمه مع الـRAPD والـ ISSR على التوالى مع الكنترول و المعاملة الرابعة ، بينما المعاملة الرابعة لم تظهر أى حزم متخصصة مع تكنيك الـ RAPD . وأظهر تحليل الـ ISSR نتائج أكثر دقة حيث أعطى درجه أعلى من تعدد الأشكال (polymorphism) مقارنة بنتائج تكنيك الـ RAPD . من ناحية أخرى فإن نتائج الـ ISSR على نبات الأنسيليا المعاملة بالسيكوسيل بتركيز 4000 جزء فى المليون أعطت دليل على أن نشاط الـ telomerase ربما حدث له تغيير . من النتائج المتحصل عليها فقد أوصت هذه الدراسة بأن تركيز 4000 جزء فى المليون من السيكوسيل يمكن استخدامه بنجاح للحصول على نباتات متقزمة من الأنسيليا Encelia farinosa حيث أنه من الناحية الإقتصادية يمكن إستخدام النبات كنبات أصص متقزم وهذا يضيف قيمة جمالية جديدة ومرغوبة بالنسبة لهذا النبات بالإضافة إلى قيمته التنسيقية. من ناحيه أخرى فإن الـ ISSR هو تكنيك دقيق للتعرف على التتابعات الطرفيه telomeres حيث يمكن التعرف من خلاله على التغيرات التى تحدث فى هذه المنطقه وكذلك يمكن إستخدامه فى برامج التربيه الخاصه بنبات الـ Encelia .
Abstract
The growth retardant cycocel (2–chloroethyl, trimethyl ammonium chloride) was used at concentrations of 0, 1000, 2000, 3000 and 4000 ppm to induce dwarfism in the ornamental plant Encelia farinosa in two consecutive seasons 2004/2005 and 2005/2006 at the Ornamental Plants Research Gardens, Faculty of Agriculture, University of Alexandria. Regenerated plants were evaluated using morphological and molecular markers of RAPD and ISSR. The retarding effect of cycocel on the plant was significantly higher than that of the control. The maximum effect at the concentration of 4000ppm, showing the highest reduction in plant height, leaf area, shoot fresh and dry weight. On the other hand, the number of branches per plant and leaf chlorophyll content were increased with increasing cycocel concentration, the maximum mean was recorded with the highest cycocel concentration (4000 ppm). The most important variations obtained were plants with upright growth, dwarfed growth or leaf deformaties at the highest concentration of cycocel. A total of six RAPD and thirteen ISSR primers were used to get a total of 132 RAPD and 159 ISSR bands for overall samples. Results revealed that the highest number of specific bands were 7 RAPD and 20 ISSR markers with the control and fourth treatment (E4), respectively, while E4 has no specific bands with the RAPD primers. ISSR analysis provided more accurate results as it revealed higher degree of polymorphism than that revealed by RAPD. On the other hand, the data with ISSR on Encelia plants treated by 4000 ppm cycocel provide evidence that telomerase activity may be altered. The present study recommends that the 4000ppm of cycocel is useful to produce dwarfism in Encelia plants, which is economically important as a pot plant, also using ISSR as rapid and accurate method for identification of altered telomeres and breeding program in Encelia plants.
أ.د. هاديه أحمد هيكل | Prof. Dr. Hadia Ahmed Heikal | 9244