عنوان المقالة:استحداث الكالس وتكوين الأجنة الجسمية من زراعة أجزاء الورقة لنبات الكلاديولس Gladiolus hybrida Callus initiation and Somatic embryogenesis from the leaf explants of Gladiolus hybrida
أجريت هذه الدراسة في مختبر زراعة الخلايا والأنسجة النباتية التابع لقسم البستنة وهندسة الحدائق / كلية الزراعة والغابات / جامعة الموصل خلال المدة من أب ( 2008 ) لغاية شباط ( 2009 ) على نبات الكلاديولس صنف " White prosperity " , إذ زرعت أجزاء وسطية أو قاعدية من أوراق ناتجة من الزراعة النسيجية على وسط MS المجهز بمنظمات النمو التالية : NAA بالتراكيز (صفر , 1.0 , 2.0 , 4.0 , 6.0 ) ملغم / لتر و 2,4-D بالتراكيز ( صفر , 0.01 , 0.02 , 0.1 , 0.2 ) ملغم / لتر وTDZ بالتراكيز ( صفر , 1.0 , 2.0 , 3.0 , 4.0 ) ملغم / لتر بهدف استحداث الكالس وتمايزه . تشير النتائج إلى الحصول على أعلى نسبة لتكوين الكالس90 % من زراعة أجزاء الأوراق على وسط MS المزود بـ 0.2 ملغم / لتر 2,4-D وهذه المعاملة أعطت أعلى كمية من الكالس واحتاجت إلى أقل عدد أيام لبدء تكوين الكالس (30) يوم, الكالس المتكون زرع على وسط MS المزود بـ ( صفر , 0.1 , 0.2 ) ملغم / لتر BA لغرض تمايزه وأعطى أفضل نسبة تمايز للأفرع من الزراعة على الوسط المزود بـ 0.1 ملغم / لتر BA بنسبة 80 % وبعدد أفرع 10فرع / جزء نباتي وهذا بدوره أعطى أعلى معدل لطول أطول فرع 6.5 سم وأعلى معدل لعدد الجذور 17 جذر / جزء نباتي وبمعدل طول لأطول جذر 4.3 سم بعد 8 أسابيع من الزراعة . كما تم الحصول على الأجنة الجسمية Somatic embryogenesis )) من خلال زراعة الكالس الناتج من زراعة قواعد الأوراق على وسط MS المزود بـ 0.2ملغم/لتر 2,4-D بعد 8 أسابيع من الزراعة ثم الزراعة على وسطMS خالي من منظمات النمو إذ تم تشخيص المراحل الثلاثة لتكوين الأجنة الجسمية ( الطور الكروي والقلبي والطوربيدي ) , الأجنة الناتجة تطورت إلى نبيتات من خلال زراعتها على وسط MS المزود بـ على 0.2 ملغم / لتر IAA بعدها تم أقلمتها في المختبر وبنسبة بقاء 100% . ومن حساب عدد الكروموسومات للنباتات الناتجة من زراعة الكالس و النباتات الناتجة من الحقل تبين أنها متشابهة في عدد الكروموسومات (60 كروموسوم ) مما يدل على عدم حدوث تغايرات وراثية فيما بينها .
Abstract
The present study was carried out in Plant Tissue Culture laboratory
Department of Horticulture and Landscape Design , College of Agriculture and
Forestry , Mosul University, from August . ( 2008 ) to February ( 2009 ), of
Gladiolus plants " White prosperity " cv. Medium and base parts of leaves
produced in vitro cultured on MS medium supplemented with NAA at ( 0.0 , 1.0 ,
2.0 , 4.0 , 6.0 ) ml/l , 2,4-D at ( 0.0 , 0.01 , 0.02 , 0.1 , 0.2) ml/l , TDZ at ( 0.0 ,
1.0 , 2.0 , 3.0 , 4.0 ) ml/l for callus initiation and differentiation , Data refers ,
highest percentage 90 % for callus formation were obtained from culture parts of
leaf on MS medium supplemented with 0.2 ml/l 2,4-D . and this treatment gave
highest amount of callus and need lowest day (30) days to callus formation ,
callus culture on MS medium supplemented with BA at ( 0.0 , 0.1 , 0.2) ml/l for
differentiation , gave 80 % of callus differentiation to shoots and gave 10 shoot /
B A
explant with longest shoot 6.5 cm and highest root number 17 root / explant with
longest root 4.3 cm after 8 weeks . Somatic embryogenesis obtained from culture
callus produced from culture base of leaf on MS medium supplemented with 0.2
ml/l 2,4-D for 8 weeks and then culture on MS medium free from hormones ,
three stage of Somatic embryogenesis observed ( globular, heart , terbenoid )
embryos were development from culture on MS medium supplemented with 0.2
ml/l IAA and acclimated in laboratory with survival 100 % , plants produced
from tissue culture or from feiled had the same number of chromosome (60) and
this indicate that there were no somaclonal variation between them
أ.د. علاء هاشم يونس الطائي | Prof-Dr-Alaa Hashim Younis Altaee | 23087